浮游菌采樣器用于制藥GMP廠房、乳制品廠房、醫(yī)院手術室、生物潔凈、發(fā)酵工業(yè)等潔凈室和無菌環(huán)境中的空氣微生物檢測以及有關研究教學部門作空氣微生物的采樣研究。
浮游菌采樣器一種多孔吸入式塵菌采樣器。它根據(jù)顆粒撞擊原理和等速采樣理論設計,采樣直接,采樣口風速與潔凈室內(nèi)風速基本一致,能更準確地反映潔凈室內(nèi)的微生物濃度。采樣時,帶塵菌空氣高速通過微孔,被撞擊在培養(yǎng)皿內(nèi)的瓊脂表面;這些活體微生物在培養(yǎng)過程中,發(fā)生動態(tài)再水化過程,高速生長,從而更快得出結(jié)果。
浮游菌采樣器的測試流程:
測試方法
4.1 方法提要
本方法采用計數(shù)濃度法,即通過收集懸游在空氣中的性粒子于專門的培養(yǎng)基,經(jīng)若干時間,在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù),從而判定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微數(shù),以此來評定潔凈室(區(qū))的潔凈度。
4.2 所用的儀器、設備和培養(yǎng)基
a)浮游菌采樣器;
b)真空抽氣泵;
c)培養(yǎng)皿;
d)培養(yǎng)基;
e)恒溫培養(yǎng)箱。
4.3 浮游菌采樣器
浮游菌采樣器宜采用撞擊法機理的采樣器,一般采用狹縫式采樣器或離心式采樣器。
4.3.1 采用的浮游菌采樣器須要有流量計和定時器。
4.3.2 狹縫式采樣器的原理
狹縫式采樣器由附加的真空抽氣泵抽氣,通過采樣器的縫隙式平板,將采集的空氣噴射并撞擊到緩慢旋轉(zhuǎn)的平板培養(yǎng)基表面上,附著的活微粒子經(jīng)培養(yǎng)后形成菌落,予以計數(shù)。
4.3.3 離心式采樣器的原理
離心式采樣器由于內(nèi)部風機的高速旋轉(zhuǎn),氣流從采樣器前部吸入從后部流出,在離心力的作用下,空氣中的活微粒子有足夠的時間撞擊到專用的固形培養(yǎng)條上,經(jīng)培養(yǎng)后形成菌落,予以計數(shù)。
4.3.4 狹縫式采樣器的使用要點
應嚴格按儀器說明書的要求進行操作。
4.3.4.1 校驗
采樣器須按儀器的檢定周期,定期對儀器作檢定,以保證測試數(shù)據(jù)的可靠性。校驗的項目有:定時器、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速、流量計。
4.3.2 每次測試前應按說明書上的規(guī)定,先接通電源,啟動真空抽氣泵,然后調(diào)節(jié)流量計及定時器。
4.3.4.3空氣采樣量根據(jù)需要選定。已知采樣器的流量(L/min),設定采樣時間(min),兩者相乘即采樣量(L)。
4.3.4.4 注意事項
4.3.4.4.1 采樣口須用便于消毒及化學性能穩(wěn)定的材料制造。
4.3.4.4.2 采樣管嚴禁滲漏,內(nèi)壁應光滑。
4.3.4.4.3 采樣管的長度應根據(jù)測點的高度定,盡量減少彎曲。
4.4 真空抽氣泵
4.4.1 真空抽氣泵的排氣量應與采樣器匹配。
4.4.2 宜采用無油真空抽氣泵,必要時可在非氣口安裝氣體過濾器。
4.4.3 真空抽氣泵安裝的位置須適當,一般裝在采樣器下面。
4.5 培養(yǎng)皿
4.5.1 狹縫式采樣器一般采用?150mm×15mm、?90mm×15mm、?65mm×15mm三種規(guī)格的硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。可根據(jù)所選用采樣器選擇合適的培養(yǎng)皿。
4.5.2 離心式采樣器采用專用的固形培養(yǎng)條。
4.6 培養(yǎng)基
普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基或其他藥典認可的培養(yǎng)基。其配制方法見附錄A(標準的附錄)。
浮游菌采樣器
4.7 恒溫培養(yǎng)箱
須定期對培養(yǎng)箱的溫度計進行檢定。
4.8 測試步驟
4.8.1 測試前儀器、培養(yǎng)皿表面須嚴格消毒。
4.8.1.1 采樣器進入被測房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌,用于100級潔凈室的采樣器宜一直放在被測房間內(nèi)。
4.8.1.2 用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。
4.8.1.3采樣前,先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面,采樣結(jié)束,再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。
4.8.1.4采樣口及采樣管,使用前須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的外壁及內(nèi)壁進行消毒時,應將管中的殘留液倒掉并晾干。
4.8.1.5 采樣者應穿戴與被測潔凈區(qū)域相應的工作服,在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前,雙手用消毒劑消毒。
4.8.2 狹縫式采樣器的采樣程序
4.8.2.1儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿,開動真空泵抽氣,使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā),時間不少于5min,并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。
4.8.2.2 關閉真空泵,放入培養(yǎng)皿,蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。
4.8.2.3 置采樣口于采樣點后,依次開啟采樣器、真空泵,轉(zhuǎn)動定時器,根據(jù)采樣量設定采樣時間。
4.8.3 培養(yǎng)
4.8.3.1 全部采樣結(jié)束后,將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.8.3.2 在30℃~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),時間不少于48h。
4.8.3.3 每批培養(yǎng)基應有對照試驗,檢驗培養(yǎng)基本身是否污染??擅颗x定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。
4.8.4 菌落計數(shù)
4.8.4.1 用肉眼直接計數(shù)、標記或在菌落計數(shù)器上點計,然后用5~10倍放大鏡檢查,有否遺漏。
4.8.4.2 若平板上有2個或2個以上的菌落重疊,可分辨時仍以2個或2個以上的菌落計數(shù)。
4.8.5 注意事項
4.8.5.1 使用前仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量,培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不能使用。
4.8.5.2 采取一切措施防止采樣管的污染和其他為對樣本的污染。
4.8.5.3 對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。
4.8.5.4由于細菌種類繁多,差別甚大,計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察,不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落,并須注意細菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別,必要時用顯微鏡鑒別。
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